Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒，是一种基于WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐），CCK-8试剂盒适用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

　　CCK-8试剂盒实验原理：

　　WST-8属于MTT的升级产品，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物（formazan）。颜色的深浅与细胞的增殖成正比，与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值，间接反映活细胞数量。

　　CCK-8试剂盒用途：

　　CCK-8法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增  殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。

　　CCK-8试剂盒用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验。那么用于细胞毒性测定的操作步骤是什么呢？

　　方法/步骤1:

　　在96孔板中配制100μl 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃，5% CO2 的条件下)。

　　方法/步骤2:

　　向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。

　　方法/步骤3:

　　将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。

　　方法/步骤4:

　　向每孔加入 10μl CCK8 溶液（Engreen） (注意不要在孔中生成气泡，它们会影响 OD 值的读数)。

　　方法/步骤5:

　　将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。

　　方法/步骤6:

　　用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。

　　方法/步骤7:

　　如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μl 0.1 M HCl溶液或者1%w/vSDS 溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。

　　以上就是CCK-8试剂盒的相关使用说明，以供参考！