1.保持每次加样的两步要有太大的差异，所以有条件的应该考虑使用排枪。

　　2.枪内有气泡应该先快速打空枪，将气泡排出。

　　3.板内有气泡可以考虑用空枪将其吸出，不过小心不能碰到底板！

　　4.尽量用排枪，做好笔记，一次做完，避免下次还要做标准。

　　5.加完现色液后，放入一个可推拉的抽屉内，就可以避光振荡了。

　　操作注意：

　　1.吸取样品时，加样枪吸头不应黏附多余的液体；加样时不可90度向孔中滴加液体，这样会导致液体残留在吸头上，加样不准确。

　　2.不要将吸头伸入孔中，一方面若接触孔底可能压弯吸头，另一方面可能会将孔中的液体吹起来，加样不准确。

　　其实给ELISA试剂盒样本加样并不是什么大问题，很多事情往往是被操作者们给想复杂了，只要有足够的耐心与认真，就一定可以做出漂亮的实验！

　　在ELISA试剂盒试验中的各项操作细节有许多，如尽量少用排枪、勤换枪头，细节决定成败，这对于试验室科研工作者来说也是如此。加样时由低浓度向高浓度加，由于这样能够削减跳孔的几率。而整个试验的*后要害便是成果的处理办法了，那么在在今日的技术文章中。

　　为您带来的是ELISA试剂盒成果分析办法:

　　1：ELISA试验中样品都要做复孔或三孔，然后计算每个浓度规范品的均匀OD值，复孔的变异系数应该小于20%。

　　2：均匀OD值减去空白孔的OD值。

　　3：制造规范曲线。

　　以减去本底后的OD值为X轴，规范品的浓度为Y轴，运用作图软件得出一个适宜的计算办法。主张运用适宜的软件来作图，比方CurveExpert 1.4。这款软件能够给出许多种办法(比方直线、半对数、对数、四参数方程等)并从中挑选一条*适宜的方程。要想检验某条曲线是否与表中数据符合，能够将规范品的浓度作为未知数，将对应的OD值带入该方程，计算出规范品的浓度，得到的成果应该与实际浓度很挨近(+/-10%)。挑选拟合度的那条曲线。

　　如果呈现规范曲线的线性欠好，或平行性欠好(双孔对照孔的OD值不同很大)，或呈现跳孔的现象，可能引起的原因有酶标板孔间彼此污染、洗板后未能尽快进行下一步操作、添加样品或其它试剂时操作的办法不对、孵育位置避光性不佳或盖板膜没有密封好使得水分蒸腾、酶标板孔问参加的试剂量不同，相对应的解决办法是加样时请当心勿将液体溅人另一孔中，人工洗板时也请当心，勿将洗涤液溅人另一微孔中、在洗板后及时进行下一步操作、添加试剂时请悬空滴入，牢记勿将枪头接触到板孔内，吸取不同试剂瓶中的液体时就要替换一次枪头、确认孵育环境不透光，盖板膜将酶标板密封好、运用已校正过的微量加样器，如将次参加液体时枪头上留有一滴的液体滴下，那么将今后枪头上留有的液体也滴下，以保证参加液体体积的一致性。