小鼠ELISA试剂盒用纯化的小鼠NLRP3抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入小鼠NLRP3,再与HRP标记的NLRP3抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的NLRP3呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠NLRP3浓度。
小鼠ELISA试剂盒操作步骤:
1.细胞上清:
处理前有必要是细胞离心去除,每孔直接加100μl即可.假如浓度太高需稀释时,用规范品稀释液直接稀释.
?2.脑脊液:
处理前有必要是细胞离心去除,每孔直接加100μl即可.假如浓度太高需稀释时,用规范品稀释液直稀释.
3.血清血浆:
请参加50ul样本剖析缓冲液后加50ul标本,如稀释量大,请将样本与样本剖析缓冲液等量参加,缺乏部分用规范品稀释液补充至100ul.
A.血清标本应是自然凝结后,取上清,防止在冰箱中凝结血液;
B.血浆标本,引荐用EDTA的方法搜集若待测样本不能及时检测,标本搜集后请分装,冻存于-20℃,防止反复冻融.
C.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;
D.标本应清澈通明,检测前样本中如有悬浮物应经过离心去除;
E.请勿运用溶血,高血脂或污染的标本检测,不然成果将不准确。