VEGF Elisa试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠血管内皮生长因子（VEGF）单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。

　　ELISA的基本原理就是将抗原抗体固定到特定的载体上进行反应，并通过酶催化底物发生化学变化将抗原抗体反应通过颜色的形式显现出来。

　　注意事项：

　　1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。

　　2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。

　　3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

　　4、牢记样本已经稀释5倍，计算结果乘以5才是样本实际浓度。

　　5、本试剂盒定量范围为10-320ng/L，超过此范围，为标准曲线延伸计算所得，不做为准确定量结果，请用特殊稀释液稀释后测定准确结果（10-320ng/L范围内），乘以总稀释倍数即为样本zui终浓度。

　　6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

　　7、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。

　　8、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。

　　9、底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。