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人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16 实验原理
更新时间:2010-09-09      阅读:2094

   人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγR/CD16 实验原理                 

                                                                          
产品名称:人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγR/CD16)ELISA Kit

 

规格:原装/96T ELISA试剂盒 分装 48T/96T ELISA试剂盒

实验原理:人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγR/CD16)ELISA Kit

 

  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγR/CD16)ELISA Kit

水平。用纯化的免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγR/CD16)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγR/CD16)再与HRP标记的免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγR/CD16)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγR/CD16)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγR/CD16浓度。

 

样本处理及要求

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000/分)去除颗粒。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBSPH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8的温度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

试剂盒组成:

1

20倍浓缩洗涤液

30ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

标准品(180 ng/L

0.5ml×1

3

酶标包被板

12孔×8

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

1

5

显色剂A

6ml×1

11

封板膜

2 

6

显色剂B

6ml×1/

12

密封袋

1

注意事项::

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.   请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔OD值的),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.   严格按说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

6.本试剂不同批号组分不得混用。

7.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.底物请避光保存。

安全性
1
 避免直接接触终止液和底物。如不小心接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2
 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3
 不要用嘴接触试剂盒里的任何成份。

4   Elisa试剂盒请远离儿童

自备物品:

1 37 ℃ 恒温箱

2 、 标准规格酶标仪

3 、 精密移液器及一次性吸头

4 、 蒸馏水

5 、 一次性试管

6 、 吸水纸

 

保存条件及有效期:

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月

 

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