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葡聚糖凝胶G-100
参考价:¥300

型号:

更新时间:2018-10-12  |  阅读:2651

详情介绍

货号

产品名称

英文名称

CAS号

产品特征

Js14029-100g

葡聚糖凝胶G-10

Sephadex G-10

9050-68-4

分离:肽及球形蛋白质:~700;葡聚糖(线性分子):~700

Js14029-25g

葡聚糖凝胶G-10

Sephadex G-10

9050-68-4

分离:肽及球形蛋白质:~700;葡聚糖(线性分子):~700

Js14029-500g

葡聚糖凝胶G-10

Sephadex G-10

9050-68-4

分离:肽及球形蛋白质:~700;葡聚糖(线性分子):~700

 

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此说明仅限参考

 

葡聚糖凝胶 G 系列使用说明

 

化学和物理性质

 

葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶,含有大量的羟基,很容易在水中和电解质溶液中溶胀。亲水基质使其非特异性吸附小化,并在生物分子分离期间得到较高的回收率。G 型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度,因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。

葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要*分辨率的柱色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程,可在较低的压力下获得较高的流速。另外, 粗级也可用于批量工艺。

产品说明

 

产 品 名 称

分离范围(球蛋白)

葡聚糖凝胶 G-10

<700

缓冲液交换、脱盐,分离小分子,去除小分子

葡聚糖凝胶 G-15

<1500

缓冲液交换、脱盐,分离小分子,去除小分子

葡聚糖凝胶 G-25

1000-5000

工业上脱盐及交换缓冲液

葡聚糖凝胶 G-50

1000-30000

多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定

葡聚糖凝胶 G-75

2000-70000

蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定

葡聚糖凝胶 G-100

2000-120000

蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定

葡聚糖凝胶 G-150

5000-300000

蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定

葡聚糖凝胶 G-200

5000-600000

蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定

使用方法

 

葡聚糖凝胶 G 系列产品以干粉形式存在,使用前必须溶胀,在膨胀期间应避免过度搅拌,因为它可能破坏填料,不要使用磁力搅拌器。

3.1 填料的准备

(1) 将填料在过量去离子水或缓冲液中,室温条件下膨胀 3 小时,或用热水膨胀 1 时。洗脱缓冲液不应含有高粘度的试剂。溶胀过程中,如果上层有碎胶,请去除。

(2) 将溶胀好的填料,所有的缓冲液等材料平衡至实验操作温度。

3.2 装柱

    检查层析柱所有部件,特别是过滤网,密封圈,螺旋塞是否紧密,玻璃管是否干净和完整。

  • 将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位液面略高于滤膜,务 必使底端无气泡。
  • 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。
  • 打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过,使柱床稳定注意压力不要超过填料大耐压

3.3 平衡

上样前平衡层析柱至少 5-10 个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止流出液的 PH 和等电点等于上柱的Buffer PH 值和等电点

3.4 上样

样品一定要离心或过滤后(0.45um)上样。

凝胶过滤的上样量一般为不大于 5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的柱床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到 20%的柱床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱高过高的凝胶层会引起较大的反压,应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制,脱盐时高径比为 51 即可。

3.5 洗脱方法

可以用无盐水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱 Buffer 中加入 NaCl 等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以*分离纯化。

3.8 在位清洗(CIP

凝胶使用十次后作一次 CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以

40cm/h 0.1 M 氢氧化钠洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。

注意事项:

1. 上样之前,样品必须经过膜过滤及去除色素,否则杂质及色素会被吸附到填料上,影响填料的正常使用。

2. 在使用过程中,避免使用高浓度的强酸强碱,酸和碱的浓度应低于 0.15 摩尔。碱会使流速变慢。

3. 不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行。

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