改良 Lillie-Mayer 苏木素染色液

产品简介：

苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称 HE 染色，是病理学和组织学常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA，在DNA 的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易不带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。

改良Lillie-Mayer 苏木素染色液无毒，无氧化膜，细胞核染色质着色深而细微，临床上常替代Harris 苏木素染色液。对细胞核染色很清晰，不着染胞质和纤维成分，属进行性

染色，故染色后可以不用盐酸乙醇分化，染色时间约 5～8min，如果是充分氧化后可染色 3～

5min。常用于糖原等特染、酶组化和免疫组化等染色后复染细胞核作对照染色，尤其适用  于经过特殊染色后不能经酸处理时对细胞核的复染。在特殊染色中，常不天青石蓝B液联合染色，使细胞核染色后不被后续的酸性染料所褪色。

染色原理：

1、细胞核染色的原理：

苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA

双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA 双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易不带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

2、细胞浆染色的原理：

伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色不染液的 pH 值密切相关。当染色液 pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7～5.0)以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可   被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，不胞浆蛋白质带正

电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。

3、分化作用：

染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所 用的溶液称为分化液。在HE 染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木素的醌型结构，使组织不色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后，必须用 1%盐酸乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去，再进行伊

红染色，才能保证细胞核不细胞浆染色的分明。

4、返蓝作用：

分化之后，苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色；在碱性条件下处于蓝色

离子状态，呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色，立即用水除去组织切 片上的酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝，但所需时间较长。

产品组成：改良 Lillie-Mayer  苏木素染色液 100ml 500ml RT 避 光

自备材料：

1、酸性乙醇分化液

2、蓝化液，如稀氨水、碳酸锂溶液等

3、系列乙醇

4、伊红染色液

5、4%多聚甲醛

操作步骤(仅供参考)：

(一)石蜡切片染色

1、切片脱蜡至水

①□二甲苯作用 2 次，每次 5～10min。

②□(可选)无水乙醇作用 2 次，每次 3～5min。

③□95%的乙醇 3～5min

④□90%的乙醇           3～5min

⑤□80%的乙醇           3～5min

⑥□自来水或蒸馏水冲洗   1～3min

2、染色

①改良 Lillie-Mayer 苏木素染色液染色     5～8min

②自来水或蒸馏水冲洗                     5～10s

③(可选)盐酸乙醇分化                      2～5s

④自来水冲洗                             20～30s

⑤(可选)蓝化液返蓝                        20～40s

⑥自来水冲洗                              30～60s 3～5min

⑦伊红染色液染色                          3～5min

⑧□自来水冲洗                             1～5s

2、脱水、透明、封固

①□80%乙醇       10～20s

②□90%乙醇              10～20s

③□95%乙醇作用 2 次，每次 1～2min。

④□无水乙醇作用 2 次，每次 2～3min。

⑤□二甲苯透明 3 次，每次 2～3min。

⑥□中性树脂封片。          

染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、肌纤维、胶原纤维等呈深浅不一的红色；角蛋白、红细

胞等呈明亮的橙红色。

(二)冰冻切片染色

1、乙谜醚-乙醇混合固定液        5～10s

2、自来水冲洗                2～5s

3、改良 Lillie-Mayer 苏木素染色液滴染 1～2min(可加热至 50℃)。

4、自来水冲洗            2～5s

5、(可选)盐酸乙醇分化      2～5s

6、自来水冲洗             2～5s

7、(可选)蓝化液返蓝         2～5s

8、自来水冲洗               5～10s

9、伊红染色液染色           2～5s

10、自来水冲洗              1～2s

11、80%的乙醇              1～2s

12 、95%的乙醇             1～2s

13、无水乙醇                2～5s

14、苯酚二甲苯(1:3)                 2～5s

15、二甲苯透明 3 次，每次 2～5s。

16、中性树脂封片

染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。

(三)细胞染色

1、4%多聚甲醛固定 10～20min。

2、自来水冲洗 2 次，每次 2min。

3、蒸馏水冲洗 2 次，每次 2min。