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伊红染色液(水溶,5%)
产品简介:
伊红(Eosin)又称曙红,属人工合成染料中的呫吨类染料,为桃红色或粉红色的粉末。 分子式为 C20H6O5Br4Na2,分子量为 691.86。伊红适宜于苏木精配合染色以显示正常或病理组织的形态结构。水溶性伊红 Y 含有一个醌型苯环的发色团和两个形成钠盐的酸性助色团(R-COONa、R-ONa)。这种形成盐类的酸性染料在水中溶解时解离为带负电荷的色酸部分(R-COO 、R-O ),即染料的有色部分和带正电荷的钠离子部分(Na+)。染色时伊红 Y 带负电荷的色- 酸部分-不组织内带正电荷的物质以离子键的形式结合而显色。
伊红染色液(Eosin Y Stain)采用*防腐剂,操作简单,不使用汞、甲醇等有毒试剂,可以用于组织切片或培养细胞的染色。可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在伊红染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色,另一方面也可以在免疫组化染色后再进行伊红复染。本染色液可以重复使用,直至认为效果不佳时再换用新的染色液,染色后细胞浆呈粉红色或红色。
产品组成:Eosin Y Stain(5%) 100ml 500ml RT 避 光
自备材料:
1、蒸馏水
2、4%多聚甲醛
3、系列乙醇
操作步骤(仅供参考):
根据实验具体要求操作,如果用于普通染色应稀释后,参考如下步骤:
1、样品处理
a) 对于石蜡切片:
二甲苯中脱蜡 5~10min。
换用新鲜的二甲苯,再脱蜡 5~10min。无水乙醇 5min。
90%乙醇 2min。
70%乙醇 2min。蒸馏水 2min。
b) 对于冰冻切片:
蒸馏水 2min。
用4%多聚甲醛固定 10min 以上。蒸馏水洗涤2分钟。
换用新鲜的蒸馏水,再洗涤 2min。
2、伊红染色:对于上述处理好的样品,伊红染色液染色 0.5~2min(根据染色结果和要求调整时间)。如果需要直接观察,可以用 70%乙醇洗涤2 次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行,70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。
注:如果用于免疫组化等染色后的复染,参考上述步骤在其它染色完成后进行伊红染色。
3、脱水、透明、封片或进行其它染色a)脱水、透明、封片:
95%乙醇脱水 2min。
换用新鲜的 95%乙醇再脱水 2min。二甲苯透明 5min。
换用新鲜的二甲苯,再透明 5min。用中性树胶或其它封片剂封片。
显微镜下观察,细胞浆呈粉红色或红色。
b)进行其它染色:
如果进行免疫荧光染色,或进行 Hoechst 等荧光染料的染色,在伊红染色液染色后:
70%乙醇洗涤 2 次,每次2min。
PBS 或生理盐水或 TBS 或 TBST 等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5min。
进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色。