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猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒
参考价:

型号:

更新时间:2019-06-18  |  阅读:3501

详情介绍

EA01C00                     2018-01版

猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒说明书

【产品名称】

通用名称:猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒

英文名称:Blocking ELISA Kit For Classical Swine Fever Virus Antibody test

【规格】

96T×2/盒

【用途】

用于检测中猪瘟病毒抗体,适用于猪瘟疫苗免疫状况价以及感染猪的血清学诊断

【检验原理】

本试剂盒是用来检测猪血清中猪瘟病毒抗体的试剂盒。该试剂盒是用猪瘟病毒抗原包被的微量反应板利用阻断ELISA原理来检测猪血清中猪瘟病毒抗体。用酶标仪在双波长(450nm,630nm)测定该反应体系的吸光度。当被测样品中含有猪瘟病毒抗体(阳性结果)时,显色就会变浅,当被测样品中不含有抗猪瘟病毒抗体(阴性结果)时,颜色就会变深。样本的阻断率可以通过与阴性对照吸光度的比值来确定。

【主要组成成份】

1

抗原包被板

96T×2

2

酶标记物

22ml

色帽

3

样本稀释液

50ml

透明

4

阴性对照血清

1ml

绿色帽

5

性对照血清

1ml

红色帽

6

显色剂

12*2ml

色帽

7

终止液

12ml

色帽

8

20X浓缩洗涤液

50ml

白色帽

9

盖板膜

2张

 

10

说明书

1份

 

【自备器材】

1酶标仪双波长450/630nm滤光片

2.精确的微量移液器(单道1-100ul、0.5-10ul、多道30-300ul)

3.水浴箱或恒温箱

4.微量振荡器

5.洗液吸移装置

6.一次性头(10ul,200ul)

7.去离子水

【样本要求】

本试剂检测的样本为猪血清或血浆,样本应无菌采集,2~8贮存应不超过一周,长期应在-20以下保存。

【实验准备】

1.试剂盒组分回温平衡:试剂盒组分在实验前,先取出置室温30min,可以获得jia结果。

2样本稀释:用试剂盒提供的样本稀释液将样本和阴性阳性对照血清作2倍稀释(即:60μl血清加60μl样本稀释液),混合均匀。

3配制洗涤液将试剂盒所提供浓缩洗涤液直接用去离子水稀释20倍(即1ml浓缩洗涤液加19ml水),即可使用。注意:使用前要使结晶*溶解。

【检验方法】

1.加样:根据样本数量,取所需板条,检测时,设阴、阳性对照各2孔,分别加入稀释好的阴性性对照血清100μl于相应孔中。其余为样本孔,每孔加100μl用样本稀释液稀释好的样本(可做单孔也可双孔检验)

2.温育:加样后,盖上盖板膜,置37温育120分钟。

3.洗板:甩去孔内液体,用洗涤液注满反应板孔,静置10秒,直接甩出,洗涤3次,后一次洗涤后在吸水纸上拍干板内液体。

4.加酶:每孔加酶标记物100μl。

5. 温育:加好酶标记物的反应板盖好盖板膜,置37温育30分钟。

6.洗板:同步骤3。

7.显色:每孔加显色剂100μl,振荡混匀,37避光反应10分钟。

8.终止:每孔加终止液50μl,振荡10秒,充分混匀,终止后即读数。

9.读数:以450nm/ 630nm双波长检测,读取各孔吸光度值(OD值)。

【结果判定】

在酶标仪上测各孔OD值,试验成立条件是阴性对照OD值大于1.0,阳性对照的阻断率均大于50%,若试验不成立,有可能是操作失误造成,应重读说明书,再操作一次。

S=样品孔OD值,N=阴性对照孔平均OD值

阻断率=(1–S/N)×100%

若被检样品的阻断率小于或等于30%,该样品判为CSFV阴性。

若被检样品的阻断率大于或等于40%,该样品判为CSFV阳性。

若被检样品的阻断率在30%~40%之间,该样品判为可疑。

【注意事项】

1.本试剂盒仅供研究使用

2.不要使用过期的试剂盒组分,不要把不同批次的组分混合使用。

3.使用试剂盒之前,一定要仔细阅读说明书。

4 使用前,浓缩的洗至室20~25),并摇动使沉淀溶解(hao37水浴中加5~10分),然后用去离子水作20倍稀(例如:50ml的浓缩液加上950ml蒸水),混,稀好的洗液在2~8可以存放7-10日。

5.本试剂盒应按含有传染性材料对待,试验废弃物应经121高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。

6.微孔板从冷藏环境中取出时应在室温中平衡。未用完的液体试剂应盖好瓶盖,与其它配套组份放入试剂盒中于2-8避光保存。

7.应用微量移液器加入样本及试剂,并经常校对其准确性。

8.加洗涤液时应做到满而不溢,防止孔口有游离酶不能洗净或各孔间的交叉污染。

9.终止液有腐蚀性,若溅到皮肤或衣物上应立即用大量清水冲洗干净。

【储存条件及有效期】

于2~8避光保存,防止冷冻,有效期12个月。

【生产日期及批号】

详见包装袋和外包装盒。

 

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