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详情介绍
产品名称:大鼠心钠素(ANP)elisa试剂盒
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠心钠素 (ANP)水平。用纯化的大鼠心钠素 (ANP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入大鼠心钠素 (ANP),再与 HRP标记的心钠素 (ANP)抗体结合,形成抗体 -抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB显色。TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的心钠素 (ANP)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度( OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠心钠素 (ANP)的含量。
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收
集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心
20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再
次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存
过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000
转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,
细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心
20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次
离心
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保
存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀
浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后
一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马
上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
检测范围:
20ng/L -400ng/L
保存条件及有效期:
1 2-8℃。
2 6个月